同位素內(nèi)標是指在分析化學(xué)中,將待測樣品中的某種同位素與已知濃度的同位素標準品混合,作為內(nèi)標來進行分析的方法。同位素內(nèi)標法具有高精度、高準確度、高靈敏度等優(yōu)點,被廣泛應(yīng)用于各種分析領(lǐng)域。
同位素內(nèi)標的原理基于同位素的特性。同位素是指現(xiàn)有想同原子序數(shù)(即愿子核史質(zhì)子的個數(shù)相同),但質(zhì)量數(shù)不同的原子核。同位素之間的差異主要體現(xiàn)在質(zhì)量上,因此同位素可以作為質(zhì)量標記物質(zhì)。
同位素內(nèi)標法技術(shù)先要使用改造核酸或蛋自質(zhì)富集體源,當同位素被放入系統(tǒng)時,它們表現(xiàn)出被能夠被不同同位素結(jié)合的特殊現(xiàn)象。該現(xiàn)象就使用的是結(jié)合雙向結(jié)合的概念采用一種專門的分析技術(shù),用來分析宿主體和同位素結(jié)合情況,為生物體研究者提供有益的信息,從而發(fā)現(xiàn)生物體,活性,信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和調(diào)節(jié)的內(nèi)在機制,以及其與特定環(huán)境因素的反應(yīng)調(diào)節(jié)。
同位素內(nèi)標法技術(shù)主要有三個步驟:先是在系統(tǒng)內(nèi)放入含有抗體或抗原成分的同位素探針,然后經(jīng)過反應(yīng)和聚集后,得到了具有體內(nèi)活性的化合物,最后,利用儀器來檢測這種反應(yīng)的強度或細胞的表型變化,然后把這些參數(shù)之間的關(guān)系圖表映射出來,為研究者提供更多有效信息。
現(xiàn)有多種穩(wěn)定同位素標記的內(nèi)標,包括2H (氘標 D) 、13C、15N、17O、18O、34S等,放射性的同位素內(nèi)標具有較大的傷害性,一般穩(wěn)定性同位素可以完成的建議優(yōu)選穩(wěn)定性同位素內(nèi)標物,若被檢測物是穩(wěn)定同位素內(nèi)標物對應(yīng)的未標物,那么,較被檢測物而言,對應(yīng)的同位素標記物只是將部分氫原子(1H)、碳原子(12C)或氮原子(14N)等被2H (氘、D)、13C、15N所取代,被檢測物與對應(yīng)的穩(wěn)定同位素內(nèi)標物理化性質(zhì)基本一致,尤其在色譜中,幾乎無法區(qū)分。